一氧化碳血紅蛋白定性檢測試劑盒一氧化碳中毒是含碳物質燃燒不時的產物經呼吸道吸入引起的，中毒機理是一氧化碳與血紅蛋白的親合力比氧與血紅

蛋白的親合力高上百倍，所以一氧化碳極易與血紅蛋白結合，形成碳氧血紅蛋白，使血紅蛋白喪失攜氧的能力和作用，

造成組織窒息，對全身的組織細胞均有毒性作用，尤其對大腦皮質的影響最為嚴重。

檢測原理是一氧化碳與血紅蛋白結合后，形成櫻桃紅色的碳氧血紅蛋白，

它對堿性物質的抵抗力強于正常血紅蛋白，通過與正常血紅蛋白的顏色比較，顏色呈櫻桃紅色的為陽性，用于定性檢測人

、動物血液的一氧化碳含量，可檢測100～150次。該試劑盒僅用于科研領域，不適用于臨床診斷或其他用途。

。

三、自備材料：

1、離心管或小試管

2、蒸餾水

3、酶標儀、96孔板

四、操作步驟(僅供參考)：

1、配制組織勻漿液(1×)∶取10ml組織勻漿液(3×)加入20ml蒸餾水即成。

2、配制PA Assay Buffer (1x)∶取10ml PA Assay Buffer (1.5×)加入5ml蒸餾水即成。

3、準備樣品︰

①血清、尿液及其他體液樣品:血清按照常規方法制備后可以直接用于本試劑盒的測定，尿液通常也可以直接用于測定，-20°C凍存。

②組織樣品︰稱取1g組織樣品置于勻漿器中，再加入1ml組織勻漿液(1x)仔細研磨，振搖提取靜置30min ,取上清液4000rpm離心10min ,取上清液,用組織勻漿液(1×)定容至2ml , -20℃凍存，用于PA的檢測。

③植物材料︰稱取1g植物材料置于勻漿器中，再加入1ml組織勻漿液(1×)仔細研磨，振搖提取,靜置30min ,取上清液4000rpm離心10min ,取上清液,用組織勻漿液(1×)定容至2ml , -20℃凍存，用于PA的檢測。

④高濃度樣品:如果樣品中含有較高濃度的PA，可以使用原有的裂解液或PBS等進行稀釋，如雞血清可稀釋5～10倍后檢測。

4、配制標準品工作液︰如果檢測血清、尿液等樣品，按取丙酮酸標準(6mg/ml):蒸餾水=1：99的比例配制，使濃度達到60μg/ml，如果檢測組織樣品按丙酮酸標準(6mg/ml) :組織勻漿液(1×)=1:99的比例配制，使濃度達到60μg/ml。

注意事項:

1、實驗材料應盡量新鮮，如取材后不立即使用，應存于-20°C.

2、實驗用蒸餾水不能含有二氧化碳，可用新煮沸且冷卻后的蒸餾水，并蓋緊口。

3、TA滴定液為堿性溶液，有腐蝕性，請小心操作。

4、TA標定液容易長菌，宜4℃保存，一旦發現有絮狀物請棄用。

5、果實中含酸量較少時可將TA滴定液適當稀釋后使用，可考慮用0.01~0.05M  TA滴定液進行滴定。

6、TA滴定液含量計算公式中，V0最好為3次空白測定的平均值。

7、如果所測樣品的濃度過高，應用TA Lysis Buffer工作液稀釋樣品后重新測定，并將稀釋倍數帶入公式。

8、如果樣品顏色較深，滴定終點不易觀察，應采用電位滴定法。

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