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當前位置:首頁   >  產品中心  >  試劑盒  >  檢測試劑盒  >  YS0547總蛋白檢測試劑盒(雙縮脲比色法)

總蛋白檢測試劑盒(雙縮脲比色法)

簡要描述:總蛋白檢測試劑盒(雙縮脲比色法),雅吉生物是一家生物企業主營ATCC細胞,細胞系,原代細胞和培養試劑,重組蛋白,ELISA試劑盒、抗體、熒光定量PCR檢測試劑盒

  • 產品型號:YS0547
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2024-10-31
  • 訪  問  量:344

詳細介紹

總蛋白(Total Protein,TP)由白蛋白和球蛋白組成,對于生物體液(血清、尿液、腦脊液)中總蛋白質含量的測定,一般要基于

如下兩個假設:1、所有蛋白質分子由純多肽組成,含氮量的質量百分比為16%;2、體液中含有數百個蛋白質分子,

每個分子對測定反應都具有非常相似的特性,目前常用的檢測總蛋白的方法有:雙縮脲法、紫外分光光度法、染料結合法

、凱氏定氮法、沉淀法等。


總蛋白檢測試劑盒(雙縮脲比色法)多用于人或動物血清、血漿、組織等樣本中的總蛋白含量測定,雙縮脲反應的原理是在呈藍色的堿性硫酸銅溶液存在

的情況下,肽鍵與銅離子結合,生成藍紫色的化合物,此化合物在540nm的吸光度與肽鍵的數量呈正比例關系,

因此可計算出蛋白質的含量,雙縮脲法測蛋白濃度兼容性亦很好,不受大部分樣本中其他成分的影響,但易受銅離

子螯合劑的影響,另外對于血清總蛋白的雙縮脲分析,脂類、血紅蛋白、葡聚糖具有一定干擾作用,

雙縮脲法在5~160mg/ml濃度范圍內有較好的線性關系。該試劑盒僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。




操作步驟(僅供參考):

1、取內徑為8mm的玻璃試管2支,分別加入白陶土-腦磷脂混懸液0.2ml。

2、靜脈采血1ml,立即取下針頭,沿管壁向各試管注入血液0.5ml,立即混勻并啟動秒表計時,并置于37℃水浴中。

3、每隔10s輕搖試管一次,觀察管內血液流動情況,直至血液凝固。記錄血液凝固所需時間,即為ACT。

4、取2支試管血液凝固時間的平均值作為ACT 值。


計算:參考區間: (1.77±0.76)min


4、配制標準品工作液︰如果檢測血清、尿液等樣品,按取丙酮酸標準(6mg/ml):蒸餾水=1:99的比例配制,使濃度達到60μg/ml,如果檢測組織樣品按丙酮酸標準(6mg/ml) :組織勻漿液(1×)=1:99的比例配制,使濃度達到60μg/ml。

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注意事項:

1、實驗材料應盡量新鮮,如取材后不立即使用,應存于-20°C.

2、實驗用蒸餾水不能含有二氧化碳,可用新煮沸且冷卻后的蒸餾水,并蓋緊口。

3、TA滴定液為堿性溶液,有腐蝕性,請小心操作。

4、TA標定液容易長菌,宜4℃保存,一旦發現有絮狀物請棄用。

5、果實中含酸量較少時可將TA滴定液適當稀釋后使用,可考慮用0.01~0.05M  TA滴定液進行滴定。

6、TA滴定液含量計算公式中,V0最好為3次空白測定的平均值。

7、如果所測樣品的濃度過高,應用TA Lysis Buffer工作液稀釋樣品后重新測定,并將稀釋倍數帶入公式。

8、如果樣品顏色較深,滴定終點不易觀察,應采用電位滴定法。

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